제주학 아카이브

제주 조릿대 잎 추출물과 p-courmaric acid, tricin 의 항염증 효능을 규명함. In vitro 실험으로 장환경과 비슷한 환경을 만들기 위해 epithelial 세포인 CaCo2 세포와 대식세포인 Raw 264.7 세포를 co-culture 하여, 제주 조릿대 잎 추출물과 활성성분의 염증성 매개인자 분비, 단백질, mRNA 발현을 측정하였음. LPS에 의해 유도된 염증매개 인자들인 NO, PGE2, IL-1β, IL-6 분비, iNOS, COX-2의 단백질 발현, TNF-a, IL-6 mRNA 발현이 조릿대잎 추출물과 p-coumaric acid, tricin에 의해 유의적으로 억제되었음. 이 실험들에서 제주조릿대 추출물의 효과가 개별 활성물질인 p-coumaric acid, tricin 효과보다 우수했음이 확인되었음. 항염효과와 마찬가지로 항암줄기세포 효과에서도 조릿대 추출물의 효과가 활성물질인 p-coumaric acid, tricin 개별효과보다 우수하였음. In vivo 실험을 통해서 제주 조릿대잎 추출물을 경구투여 했을 때 DSS유도로 짧아진 대장 길이를 회복하고 임상적 염증 지표인 DAI score, histopathology score가 개선됨을 확인하였고, 제주 조릿대잎 추출물의 투여에 따른 동물모델의 세포분열마커의 변화 분석 결과 조릿대를 경구투여한 군에서 PCNA의 발현이 억제되었음. 또한 제주 조릿대잎 추출물 투여에 따른 동물모델의 혈장에서의 염증성 매개인자인 TNF-a와 IL-6 분비, 대장조직에서의 iNOS, COX-2, PPAR-γ의 단백질 발현, MAPK인 ERK, JNK, p38의 인산화, TNF-a mRNA 발현이 억제되었음. 또한, 제주 조릿대 잎 추출물과 p-courmaric acid, tricin 의 항암줄기세포효능을 규명하였음. In vitro 실험으로 HT-29와 HCT-116 대장암세포에서 CD133+CD44+ 대장암줄기세포를 분리하여, 제주 조릿대 잎 추출물과 p-courmaric acid, tricin의 대장암 줄기세포 분화유도 효과를 cytokeratin 20 단백질 발현 증가를 통해 확인하였음. 더불어, 대장암줄기세포에서 제주 조릿대잎 추출물과 p-courmaric acid, tricin에 의해 암줄기세포의 중요한 특징인 자가복제가 억제됨을 clonogenic assay 및 sphere formation assay를 통해 규명하였음. 이러한 조릿대의 암줄기세포 억제 효능의 분자적 기전 규명을 위해 조릿대잎 추출물과 조릿대의 활성물질 처리 시 변하는 여러 암줄기세포 마커 및 암줄기세포 관련 마커와 신호전달 마커인 DLK1, Sox-2, Notch1, HIF-1α, VEGF, β-catenin 등의 단백질 발현 또는 mRNA 발현이 억제됨을 확인함으로써 조릿대의 항대장암 기능성을 세포실험 수준에서 증명하였음.